293T细胞哪种转染试剂好
来自：贴吧网友 更新日期：2024-06-02
293t和3t3细胞哪个容易转染
Lipofectamine、fugene、磷酸钙、是较为常见的转染试剂，其实目前市场上的转染试剂盒针对某些转染进行了优化，使用起来较为方便。比如：细胞类型来自于 Lonza 系列的Amaxa 人单核细胞核因子试剂盒、Invitrogen的 Silencer(R) siRNA Transfection II Kit 等试剂盒在细胞转染方面都有着较好的效果。
一、针对 siRNA 递送优化的常用转染试剂
市场上的一些生物试剂公司通过siRNA 递送的优化也达到较理想的转染效果。比如： Thermo Fisher的Dharmafect 1 ，主要优化 SMARTpool siRNA 来转染 HepG2 细胞。 还有YEASEN的INTERFERin® siRNA/miRNA体外转染试剂等可用来转染 Hela或RAW264.7 等细胞。
二、Lipofectamine RNAiMAX 转染试剂（Invitrogen）
Lipofectamine 转染试剂可以将 siRNA 快速、转染到多种细胞类型中，并且具有较高的效率。目前也常被用于将 siUch-L1 从 Ambion 传递到HEK-293 细胞，在哺乳动物细胞中导入Accell siRNA 等寡核苷酸也会用到该转染介质。国外有科研团队也在尝试使用 RNAiMax将FlexiTube 和 SMARTpool siRNA 转染到 HUVEC 细胞中。
三、Lipofectamine 2000/3000 转染试剂 (Invitrogen)
这种 Lipofectamine 试剂主要用于将 siRNA 和 shRNA 载体转染到贴壁和悬浮细胞系中。一般情况下Lipofectamine 2000 常用于转染例HEK293T 细胞或 Hela细胞。 Lipofectamine 3000，多用于 A498 细胞转染等 。
四、Lipofectamine® 转染试剂 (Invitrogen)
Lipofectamine 属于阳离子脂质体，因为其头部基团带有正电荷和 -CH2-]n-CH3。所以顶部可以与具有核酸的磷酸骨架彼此作用从而加速细胞转染。 Lipofectamine/RNA 混合形成的脂质体的表面电荷也允许脂质体/核酸复合物与带负电荷的细胞融合。
五、Oligofectamine 转染试剂（Invitrogen）
Oligofectomine 是一种专有配方，可与核酸形成稳定的复合物，以便将 siRNA 转染到真核细胞中。它具有特异性且无毒。
六、MISSION® siRNA 转染试剂 Millipore Sigma
MISSION® siRNA 转染试剂允许将 siRNA 递送到真核细胞中，从而产生 >90% 的沉默效率。使用较低浓度的 siRNA 可减少脱靶效应。
N-Ter 纳米粒子 siRNA 转染系统 Millipore Sigma
该系统允许将 siRNA 转染到难以转染的细胞类型中，包括神经元、原代、分化和非分裂细胞。它基于肽转染试剂。
苏州阿尔法生物实验器材有限公司十三年专注于生物实验室仪器设备及实验试剂耗材的供应商，主要供应的生物试剂包括 Invitrogen转染试剂、转染试剂盒、天根试剂盒、碧云天试剂等细胞学、分子生物学、生命科学相关的试剂及耗材。
Lipofectamine 3000
许多真核表达载体如pcDNA3.1中含有SV40病毒的复制起始位点，可以在表达SV40病毒T抗原的细胞系中复制，从而提高外源基因的表达水平。293T细胞就是一种表达SV40病毒T抗原的细胞系，它来源于人胚胎肾细胞293HEK，经改造后在其中插入了T抗原，因此用293T细胞做转染可以获得较高的表达水平。 293T细胞也可以作为普通的哺乳细胞用于筛选稳定表达的细胞系，不过它贴壁性差，容易脱落，不利于筛选。 3T3细胞是小鼠胚胎成纤维细胞系，它具有明显的接触抑制作用，所以易于识别已发生转化的细胞。
19380423723：什么样的转染试剂转染效果比较好呢
干蓝：答：美国SignaGen公司的GenJet （Ver.II），LipoD293及PolyJet针对哺乳动物细胞的DNA体外转染试剂，均为您提供两种不同的转染步骤——一般步骤及高级步骤，这两种步骤分别针对不同的哺乳动物细胞。高级步骤主要针对难转的哺乳动物细胞，例如：MDCK，MDA-MB231，Caco-2等细胞。使用一般的转染步骤若是转染效率...
19380423723：293T细胞转染
干蓝：答：血清的存在会干扰siRNA与转染试剂的混合，从而影响转染效率。建议用来稀释siRNA和稀释转染试剂的培养基是无血清培养基。我们实验室前段刚用RFect，siRNA方法做完A549细胞，细胞的铺板密度在45%左右，用的24孔板，每孔2ul试剂，设置的siRNA终浓度10nM,30nM,50nM,100nM四个梯度，每个梯度做了2个复孔，方便...
19380423723：293T细胞培养要点
干蓝：答：铺板技术：使用明胶包被的培养板，有助于提升细胞的初始贴附效果。 转染后的问题：转染后可能引发凋亡，建议在更换血清后再进行转染，以减少影响。293T细胞的卓越优势293T细胞以一致性高、可重复性佳而著称。它们是生产重组蛋白的理想工具，能够稳定且瞬时地表达外源基因，同时兼容多种转染方法，极大地简...
19380423723：什么是293T细胞的培养?
干蓝：答：然293T细胞的应用非常广泛, 几乎每个实验室都有一株自己的293T 细胞株, 但是经常有同学提出: 为什么在正常的培养条件下,细胞却很难传代下去, 包装病毒效率很低, 对转染效率也不满意呢？ 事实上,引起类似问题的元凶是一种生物界最小的原核细胞生物－支原体。支原体污染后, 它们不会使细胞死亡而是与...
19380423723：CRISPR/Cas9基因敲除实验全记录(5)293FT细胞转染验证 and trouble shoot...
干蓝：答：（1）sgRNA+pSpCas9载体用lipofectamine 3000转染至293FT细胞（按照转染试剂的说明书走），确保转染效率> 70%； （2）72 h后收集细胞提取基因组DNA（按照基因组DNA提取试剂盒的说明书操作）； （3）使用事先设计好的引物进行PCR扩增，这里使用的酶是NEB公司的Q5 high-fidelity Polymerase，一切按...
19380423723：293T细胞用什么培养基培养
干蓝：答：293T用DMEM高糖比较好，有些293T细胞株还需要额外加入非必需氨基酸，丙酮酸钠，谷氨酰胺才能长得更好。293是用1640 希望帮到你
19380423723：293t和3t3细胞哪个容易转染
干蓝：答：293T是人肾上皮细胞，个人认为转染难度一般；3T3是脂肪细胞，分类型的，NIH3T3比较好转，3T3L1就比较难转。对于难转染细胞，网上看到一款性价比较高的RFect小核酸转染试剂，采用纳米材料，使siRNA更容易转到细胞中，针对难转染细胞的转染阳性率高。试过几个难转染的细胞系，效果还可以，普通细胞转染更没...
19380423723：CRISPR-Cas9基因敲除实验步骤 day 5-15 转染验证
干蓝：答：简单描述以下前期的思路（其实是我自己在回顾），先准备好需要用的东西：Cas9 backbone质粒，根据基因靶点将sgRNA设计好（顺带设计一下引物），将sgRNA插入到Cas9 backone质粒中，将质粒转入感受态细胞扩增，提取质粒后酶切验证。接着就是293T细胞转染验证了。使用常规的转染试剂Lipofectamine 3000或者罗氏等...
19380423723：293t细胞转染后很多飘起来
干蓝：答：这个是转染试剂的问题，毒性略大造成的了细胞的死亡，不用无血清培养基，直接用不含双抗的完全培养基，或者试试RFECT sRNA Transfection Reagent 这个可以在转染后不更换培养基，对细胞的毒性较小
19380423723：转染的分类
干蓝：答：利用脂质体转染法最重要的就是防止其毒性，因此脂质体与质粒的比例，细胞密度以及转染的时间长短和培养基中血清的含量都是影响转染效率的重要问题，通过实验摸索的合适转染条件对于效率的提高有巨大的作用。 （1）材料293T细胞、MyoD表达质粒和EGFP表达质粒、DMEM培养基、链霉素/青霉素（双抗）、FCS（小牛...
293T是人肾上皮细胞，个人认为转染难度一般；3T3是脂肪细胞，分类型的，NIH3T3比较好转，3T3L1就比较难转。
对于难转染细胞，网上看到一款性价比较高的RFect小核酸转染试剂，采用纳米材料，使siRNA更容易转到细胞中，针对难转染细胞的转染阳性率高。试过几个难转染的细胞系，效果还可以，普通细胞转染更没有问题的。
目前大多数人都是使用的是lipofectamin 2000！！这个试剂转染效果比较好，特别是病毒包装时需要用到三种质粒，这样对转染试剂要求就要高一些
转染试剂在细胞转染、细胞识别、抗体蛋白研发等领域广泛使用，通常可以直接购买或者过实验室中DIY配制。Lipofectamine、fugene、磷酸钙、是较为常见的转染试剂，其实目前市场上的转染试剂盒针对某些转染进行了优化，使用起来较为方便。比如：细胞类型来自于 Lonza 系列的Amaxa 人单核细胞核因子试剂盒、Invitrogen的 Silencer(R) siRNA Transfection II Kit 等试剂盒在细胞转染方面都有着较好的效果。
一、针对 siRNA 递送优化的常用转染试剂
市场上的一些生物试剂公司通过siRNA 递送的优化也达到较理想的转染效果。比如： Thermo Fisher的Dharmafect 1 ，主要优化 SMARTpool siRNA 来转染 HepG2 细胞。 还有YEASEN的INTERFERin® siRNA/miRNA体外转染试剂等可用来转染 Hela或RAW264.7 等细胞。
二、Lipofectamine RNAiMAX 转染试剂（Invitrogen）
Lipofectamine 转染试剂可以将 siRNA 快速、转染到多种细胞类型中，并且具有较高的效率。目前也常被用于将 siUch-L1 从 Ambion 传递到HEK-293 细胞，在哺乳动物细胞中导入Accell siRNA 等寡核苷酸也会用到该转染介质。国外有科研团队也在尝试使用 RNAiMax将FlexiTube 和 SMARTpool siRNA 转染到 HUVEC 细胞中。
三、Lipofectamine 2000/3000 转染试剂 (Invitrogen)
这种 Lipofectamine 试剂主要用于将 siRNA 和 shRNA 载体转染到贴壁和悬浮细胞系中。一般情况下Lipofectamine 2000 常用于转染例HEK293T 细胞或 Hela细胞。 Lipofectamine 3000，多用于 A498 细胞转染等 。
四、Lipofectamine® 转染试剂 (Invitrogen)
Lipofectamine 属于阳离子脂质体，因为其头部基团带有正电荷和 -CH2-]n-CH3。所以顶部可以与具有核酸的磷酸骨架彼此作用从而加速细胞转染。 Lipofectamine/RNA 混合形成的脂质体的表面电荷也允许脂质体/核酸复合物与带负电荷的细胞融合。
五、Oligofectamine 转染试剂（Invitrogen）
Oligofectomine 是一种专有配方，可与核酸形成稳定的复合物，以便将 siRNA 转染到真核细胞中。它具有特异性且无毒。
六、MISSION® siRNA 转染试剂 Millipore Sigma
MISSION® siRNA 转染试剂允许将 siRNA 递送到真核细胞中，从而产生 >90% 的沉默效率。使用较低浓度的 siRNA 可减少脱靶效应。
N-Ter 纳米粒子 siRNA 转染系统 Millipore Sigma
该系统允许将 siRNA 转染到难以转染的细胞类型中，包括神经元、原代、分化和非分裂细胞。它基于肽转染试剂。
苏州阿尔法生物实验器材有限公司十三年专注于生物实验室仪器设备及实验试剂耗材的供应商，主要供应的生物试剂包括 Invitrogen转染试剂、转染试剂盒、天根试剂盒、碧云天试剂等细胞学、分子生物学、生命科学相关的试剂及耗材。
Lipofectamine 3000
许多真核表达载体如pcDNA3.1中含有SV40病毒的复制起始位点，可以在表达SV40病毒T抗原的细胞系中复制，从而提高外源基因的表达水平。293T细胞就是一种表达SV40病毒T抗原的细胞系，它来源于人胚胎肾细胞293HEK，经改造后在其中插入了T抗原，因此用293T细胞做转染可以获得较高的表达水平。 293T细胞也可以作为普通的哺乳细胞用于筛选稳定表达的细胞系，不过它贴壁性差，容易脱落，不利于筛选。 3T3细胞是小鼠胚胎成纤维细胞系，它具有明显的接触抑制作用，所以易于识别已发生转化的细胞。
293T是人肾上皮细胞，个人认为转染难度一般；3T3是脂肪细胞，分类型的，NIH3T3比较好转，3T3L1就比较难转。
对于难转染细胞，网上看到一款性价比较高的RFect小核酸转染试剂，采用纳米材料，使siRNA更容易转到细胞中，针对难转染细胞的转染阳性率高。试过几个难转染的细胞系，效果还可以，普通细胞转染更没有问题的。
目前大多数人都是使用的是lipofectamin 2000！！这个试剂转染效果比较好，特别是病毒包装时需要用到三种质粒，这样对转染试剂要求就要高一些